High population levels lead Glycaspis brimblecombei (Hemiptera: Aphalaridae) to unrecorded feeding and oviposition behaviors on Eucalyptus urograndis plants

Abstract The red gum lerp psyllid, Glycaspis brimblecombei Moore, 1964 (Hemiptera: Aphalaridae), an insect pest originating in Australia and which feeds only on Eucalyptus L'Hér. (Myrtales: Myrtaceae) plants, has spread to several countries. The populations of this insect commonly reach high populations on Eucalyptus plants since its entry into Brazil, and also indicated an unrecorded behavioral. The objectives of this study were to describe a peculiar adaptation in the feeding habit of G. brimblecombei and to register the new habit. The oviposition and feeding by G. brimblecombei, commonly, on the leaves of Eucalyptus, started to occur, also, on lignified twigs. This suggests a not yet recorded adaptation of this insect to reduce insect × plant intraspecific competition.

Resumo O psilídeo de concha, Glycaspis brimblecombei Moore, 1964 (Hemiptera: Aphalaridae), um inseto praga originário da Austrália e que se alimenta apenas de plantas de Eucalyptus L'Hér. (Myrtales: Myrtaceae), se espalhou por vários países. Esse inseto, geralmente, atinge grandes populações em plantas de Eucalyptus desde sua entrada no Brasil e, também, indicou um comportamento diferente. Os objetivos deste estudo foram descrever uma adaptação peculiar no hábito alimentar de G. brimblecombei e registrar o novo hábito. A oviposição e alimentação por G. brimblecombei, geralmente, nas folhas de Eucalyptus, passaram a ocorrer, também, em ramos lignificados. Isso sugere uma adaptação diferente desse inseto para reduzir a competição intraespecífica inseto × planta.

High population levels lead Glycaspis brimblecombei (Hemiptera: Aphalaridae) to unrecorded feeding and oviposition behaviors on Eucalyptus urograndis plants / Altos níveis populacionais levam Glycaspis brimblecombei (Hemiptera: Aphalaridae) a diferentes comportamentos de alimentação e oviposição em plantas de Eucalyptus urograndis

The red gum lerp psyllid, Glycaspis brimblecombei Moore, 1964 (Hemiptera: Aphalaridae), an insect pest originating in Australia and which feeds only on Eucalyptus L'Hér. (Myrtales: Myrtaceae) plants, has spread to several countries. The populations of this insect commonly reach high populations on Eucalyptus plants since its entry into Brazil, and also indicated an unrecorded behavioral. The objectives of this study were to describe a peculiar adaptation in the feeding habit of G. brimblecombei and to register the new habit. The oviposition and feeding by G. brimblecombei, commonly, on the leaves of Eucalyptus, started to occur, also, on lignified twigs. This suggests a not yet recorded adaptation of this insect to reduce insect × plant intraspecific competition.

O psilídeo de concha, Glycaspis brimblecombei Moore, 1964 (Hemiptera: Aphalaridae), um inseto praga originário da Austrália e que se alimenta apenas de plantas de Eucalyptus L'Hér. (Myrtales: Myrtaceae), se espalhou por vários países. Esse inseto, geralmente, atinge grandes populações em plantas de Eucalyptus desde sua entrada no Brasil e, também, indicou um comportamento diferente. Os objetivos deste estudo foram descrever uma adaptação peculiar no hábito alimentar de G. brimblecombei e registrar o novo hábito. A oviposição e alimentação por G. brimblecombei, geralmente, nas folhas de Eucalyptus, passaram a ocorrer, também, em ramos lignificados. Isso sugere uma adaptação diferente desse inseto para reduzir a competição intraespecífica inseto × planta.

Toll-like receptor 9 polymorphisms in brazilian patients with systemic lupus erythematosus: a pilot study / Polimorfismos do receptor toll-like 9 em pacientes brasileiros com lúpus eritematoso sistêmico: um estudo piloto

Toll-like receptor 9 (TLR9) is an important component of the innate immune system and have been associated with several autoimmune diseases, such as Systemic Lupus Erythematosus (SLE). The aim of this study was to investigate polymorphisms in TLR9 gene in a Brazilian SLE patients group and their association with clinical manifestation, particularly Jaccoud’s arthropathy (JA). We analyzed DNA samples from 204 SLE patients, having a subgroup of them presenting JA (n=24). A control group (n=133) from the same city was also included. TLR9 single nucleotide polymorphisms (SNPs) (−1237 C>T and +2848 G>A) were identified by sequencing analysis. The TLR9 gene genotype frequency was similar both in SLE patients and the control group. In the whole SLE population, an association between the homozygosis of allele C at position −1237 with psychosis and anemia (p < 0.01) was found. Likewise, the homozygosis of allele G at position +2848 was associated with a discoid rash (p < 0.05). There was no association between JA and TLR9 polymorphisms. These data show that TLR9 polymorphisms do not seem to be a predisposing factor for SLE in the Brazilian population, and that SNPs are not associated with JA.

O receptor Toll-like 9 (TLR9) é um componente importante do sistema imunológico inato e tem sido associado a várias doenças autoimunes, como o Lúpus Eritematoso Sistêmico (LES). O objetivo deste estudo foi investigar polimorfismos no gene TLR9 em um grupo de pacientes brasileiros com LES e sua associação com a manifestação clínica, particularmente a artropatia de Jaccoud (JA). Foram analisadas amostras de DNA de 204 pacientes com LES, e um subgrupo com JA (n=24). Um grupo de controle (n=133) da mesma cidade também foi incluído. Os polimorfismos de nucleotídeos únicos TLR9 (SNPs) (−1237 C>T e +2848 G>A) foram identificados pela análise de sequenciamento. A frequência do genótipo genético TLR9 foi semelhante tanto em pacientes com LES quanto no grupo controle. Em toda a população de LES, foi encontrada associação entre a homozigose do alelo C na posição −1237 com psicose e anemia (p < 0,01). Da mesma forma, a homozigose do alelo G na posição +2848 foi associada a uma erupção cutânea discoide (p < 0,05). Não houve associação entre polimorfismos JA e TLR9. Esses dados mostram que os polimorfismos TLR9 não parecem ser um fator predisponível para o LES na população brasileira, e que os SNPs não estão associados ao JA.

Toll-like receptor 9 polymorphisms in brazilian patients with systemic lupus erythematosus: a pilot study

Abstract Toll-like receptor 9 (TLR9) is an important component of the innate immune system and have been associated with several autoimmune diseases, such as Systemic Lupus Erythematosus (SLE). The aim of this study was to investigate polymorphisms in TLR9 gene in a Brazilian SLE patients group and their association with clinical manifestation, particularly Jaccouds arthropathy (JA). We analyzed DNA samples from 204 SLE patients, having a subgroup of them presenting JA (n=24). A control group (n=133) from the same city was also included. TLR9 single nucleotide polymorphisms (SNPs) (1237 C>T and +2848 G>A) were identified by sequencing analysis. The TLR9 gene genotype frequency was similar both in SLE patients and the control group. In the whole SLE population, an association between the homozygosis of allele C at position 1237 with psychosis and anemia (p 0.01) was found. Likewise, the homozygosis of allele G at position +2848 was associated with a discoid rash (p 0.05). There was no association between JA and TLR9 polymorphisms. These data show that TLR9 polymorphisms do not seem to be a predisposing factor for SLE in the Brazilian population, and that SNPs are not associated with JA.

Resumo O receptor Toll-like 9 (TLR9) é um componente importante do sistema imunológico inato e tem sido associado a várias doenças autoimunes, como o Lúpus Eritematoso Sistêmico (LES). O objetivo deste estudo foi investigar polimorfismos no gene TLR9 em um grupo de pacientes brasileiros com LES e sua associação com a manifestação clínica, particularmente a artropatia de Jaccoud (JA). Foram analisadas amostras de DNA de 204 pacientes com LES, e um subgrupo com JA (n=24). Um grupo de controle (n=133) da mesma cidade também foi incluído. Os polimorfismos de nucleotídeos únicos TLR9 (SNPs) (1237 C>T e +2848 G>A) foram identificados pela análise de sequenciamento. A frequência do genótipo genético TLR9 foi semelhante tanto em pacientes com LES quanto no grupo controle. Em toda a população de LES, foi encontrada associação entre a homozigose do alelo C na posição 1237 com psicose e anemia (p 0,01). Da mesma forma, a homozigose do alelo G na posição +2848 foi associada a uma erupção cutânea discoide (p 0,05). Não houve associação entre polimorfismos JA e TLR9. Esses dados mostram que os polimorfismos TLR9 não parecem ser um fator predisponível para o LES na população brasileira, e que os SNPs não estão associados ao JA.

Toll-like receptor 9 polymorphisms in brazilian patients with systemic lupus erythematosus: a pilot study / Polimorfismos do receptor toll-like 9 em pacientes brasileiros com lúpus eritematoso sistêmico: um estudo piloto

Abstract Toll-like receptor 9 (TLR9) is an important component of the innate immune system and have been associated with several autoimmune diseases, such as Systemic Lupus Erythematosus (SLE). The aim of this study was to investigate polymorphisms in TLR9 gene in a Brazilian SLE patients group and their association with clinical manifestation, particularly Jaccoud's arthropathy (JA). We analyzed DNA samples from 204 SLE patients, having a subgroup of them presenting JA (n=24). A control group (n=133) from the same city was also included. TLR9 single nucleotide polymorphisms (SNPs) (−1237 C>T and +2848 G>A) were identified by sequencing analysis. The TLR9 gene genotype frequency was similar both in SLE patients and the control group. In the whole SLE population, an association between the homozygosis of allele C at position −1237 with psychosis and anemia (p < 0.01) was found. Likewise, the homozygosis of allele G at position +2848 was associated with a discoid rash (p < 0.05). There was no association between JA and TLR9 polymorphisms. These data show that TLR9 polymorphisms do not seem to be a predisposing factor for SLE in the Brazilian population, and that SNPs are not associated with JA.

Resumo O receptor Toll-like 9 (TLR9) é um componente importante do sistema imunológico inato e tem sido associado a várias doenças autoimunes, como o Lúpus Eritematoso Sistêmico (LES). O objetivo deste estudo foi investigar polimorfismos no gene TLR9 em um grupo de pacientes brasileiros com LES e sua associação com a manifestação clínica, particularmente a artropatia de Jaccoud (JA). Foram analisadas amostras de DNA de 204 pacientes com LES, e um subgrupo com JA (n=24). Um grupo de controle (n=133) da mesma cidade também foi incluído. Os polimorfismos de nucleotídeos únicos TLR9 (SNPs) (−1237 C>T e +2848 G>A) foram identificados pela análise de sequenciamento. A frequência do genótipo genético TLR9 foi semelhante tanto em pacientes com LES quanto no grupo controle. Em toda a população de LES, foi encontrada associação entre a homozigose do alelo C na posição −1237 com psicose e anemia (p < 0,01). Da mesma forma, a homozigose do alelo G na posição +2848 foi associada a uma erupção cutânea discoide (p < 0,05). Não houve associação entre polimorfismos JA e TLR9. Esses dados mostram que os polimorfismos TLR9 não parecem ser um fator predisponível para o LES na população brasileira, e que os SNPs não estão associados ao JA.

Cellular consequences of small supernumerary marker chromosome derived from chromosome 12: mosaicism in daughter and father

Constitutional genomic imbalances are known to cause malformations, disabilities, neurodevelopmental delay, and dysmorphia and can lead to dysfunctions in the cell cycle. In extremely rare genetic conditions such as small supernumerary marker chromosomes (sSMC), it is important to understand the cellular consequences of this extra marker, as well the factors that contribute to their maintenance or elimination through successive cell cycles and phenotypic impact. The study of chromosomal mosaicism provides a natural model to characterize the effect of aneuploidy on genome stability and compare cells with the same genetic background and environment exposure, but differing in the presence of sSMC. Here, we report the functional characterization of different cell lines from two familial patients with mosaic sSMC derived from chromosome 12. We performed studies of proliferation dynamics, stability, and variability of these cells using fluorescent in situ hybridization (FISH), sister chromatid exchanges (SCE), and conventional staining. We also quantified the telomere-related genomic instability of sSMC cells using 3D telomeric profile analysis by quantitative-FISH. sSMC cells exhibited differences in the cell cycle dynamics compared to normal cells. First, the sSMC cells exhibited lower proliferation index and higher frequency of SCE than normal cells, associated with a higher level of chromosomal instability. Second, sSMC cells exhibited more telomeric-related genomic instability. Lastly, the differences of sSMC cells distribution among tissues could explain different phenotypic repercussions observed in patients. These results will help in our understanding of the sSMC stability, maintenance during cell cycle, and the cell cycle variables involved in the different phenotypic manifestations.

Microbial source tracking and antimicrobial resistance in one river system of a rural community in Bahia, Brazil / Rastreamento de fontes microbianas e resistência antimicrobiana em um sistema fluvial de uma comunidade rural da Bahia, Brasil

Use of antibiotics inevitably leads to antimicrobial resistance. Selection for resistance occurs primarily within the gut of humans and animals as well as in the environment through natural resistance and residual antibiotics in streams and soil. We evaluated antimicrobial resistance in Gram negative bacteria from a river system in a rural community in Bahia, Brazil. Water was collected from the Jiquiriçá and Brejões rivers and the piped water supply. Additionally, stools were collected from a random sample of residents, cows, pigs and horses near the river. The samples were screened for bacteria resistant to ciprofloxacin, cefotaxime, and meropenem and identified biochemically at the genus and species levels. Microbial source tracking demonstrated that ruminant and human fecal contamination increased as the rivers neared the village center and decreased after the last residence. Antibiotic bacteria were identified from all samples (n = 32). No bacteria were resistant to carbapenems, but the majority of the enterobacteria were resistant to ciprofloxacin, even though this class of antibiotics is not commonly used in food animals in this region. Considering these facts, together with the pattern of human fecal contamination, a human source was considered most likely for these resistant isolates.

O uso de antibióticos inevitavelmente leva à resistência antimicrobiana. A seleção para resistência antimicrobiana ocorre principalmente no intestino de seres humanos e animais, bem como no meio ambiente, através da resistência natural e resíduos de antibióticos nos esgotos e no solo. Avaliamos a resistência antimicrobiana em bactérias Gram-negativas de um sistema fluvial em uma comunidade rural da Bahia, Brasil. A água foi coletada nos rios Jiquiriçá e Brejões e no abastecimento de água encanada. Além disso, foram coletadas amostras randomizadas de fezes de moradores, vacas, porcos e cavalos próximos ao rio. As amostras foram triadas para bactérias resistentes à ciprofloxacina, cefotaxima e meropenem e identificadas bioquimicamente nos níveis de gênero e espécie. O rastreamento de fontes microbianas demonstrou que a contaminação fecal de ruminantes e humanos aumentou à medida que os rios se aproximavam do centro da vila e diminuía após a última residência. Bactérias resistentes a antibióticos foram identificadas em todas as amostras (n = 32). Nenhuma bactéria demonstrou ser resistente aos carbapenêmicos testados, contudo, foi encontrado enterobactérias resistentes à ciprofloxacina, ainda que essa classe de antibióticos não seja comumente usada na medicina veterinária dos animais dessa região. Considerando esses fatos, juntamente com o padrão de contaminação fecal avaliado, a fonte de contaminação humana foi considerada a mais provável na interação desses isolados resistentes.

Microbial source tracking and antimicrobial resistance in one river system of a rural community in Bahia, Brazil

Abstract Use of antibiotics inevitably leads to antimicrobial resistance. Selection for resistance occurs primarily within the gut of humans and animals as well as in the environment through natural resistance and residual antibiotics in streams and soil. We evaluated antimicrobial resistance in Gram negative bacteria from a river system in a rural community in Bahia, Brazil. Water was collected from the Jiquiriçá and Brejões rivers and the piped water supply. Additionally, stools were collected from a random sample of residents, cows, pigs and horses near the river. The samples were screened for bacteria resistant to ciprofloxacin, cefotaxime, and meropenem and identified biochemically at the genus and species levels. Microbial source tracking demonstrated that ruminant and human fecal contamination increased as the rivers neared the village center and decreased after the last residence. Antibiotic bacteria were identified from all samples (n = 32). No bacteria were resistant to carbapenems, but the majority of the enterobacteria were resistant to ciprofloxacin, even though this class of antibiotics is not commonly used in food animals in this region. Considering these facts, together with the pattern of human fecal contamination, a human source was considered most likely for these resistant isolates.

Resumo O uso de antibióticos inevitavelmente leva à resistência antimicrobiana. A seleção para resistência antimicrobiana ocorre principalmente no intestino de seres humanos e animais, bem como no meio ambiente, através da resistência natural e resíduos de antibióticos nos esgotos e no solo. Avaliamos a resistência antimicrobiana em bactérias Gram-negativas de um sistema fluvial em uma comunidade rural da Bahia, Brasil. A água foi coletada nos rios Jiquiriçá e Brejões e no abastecimento de água encanada. Além disso, foram coletadas amostras randomizadas de fezes de moradores, vacas, porcos e cavalos próximos ao rio. As amostras foram triadas para bactérias resistentes à ciprofloxacina, cefotaxima e meropenem e identificadas bioquimicamente nos níveis de gênero e espécie. O rastreamento de fontes microbianas demonstrou que a contaminação fecal de ruminantes e humanos aumentou à medida que os rios se aproximavam do centro da vila e diminuía após a última residência. Bactérias resistentes a antibióticos foram identificadas em todas as amostras (n = 32). Nenhuma bactéria demonstrou ser resistente aos carbapenêmicos testados, contudo, foi encontrado enterobactérias resistentes à ciprofloxacina, ainda que essa classe de antibióticos não seja comumente usada na medicina veterinária dos animais dessa região. Considerando esses fatos, juntamente com o padrão de contaminação fecal avaliado, a fonte de contaminação humana foi considerada a mais provável na interação desses isolados resistentes.

Characterization of edaphic fauna in different monocultures in Savanna of Piauí / Caracterização da fauna edáfica em diferentes monoculturas no Cerrado piauiense

Abstract Vegetation cover may show diversity and composition patterns of the soil invertebrate community, as a function of litter quantity and quality in a specific habitat. The objective of this work was to characterize the distribution of edaphic fauna in different monocultures. The study was carried out at Chapada Grande farm in Regeneração, PI. Four monoculture areas were chosen: no-tillage soybean, eucalyptus, pasture, and a preserved native cerrado forest. Soil fauna was collected in a dry and wet period by pitfall traps containing 4% formaldehyde. The edaphic fauna was evaluated by the number of individuals per trap per day, average richness and richness, Shannon diversity index and Pielou uniformity index. Data were submitted to analysis of variance and multivariate Principal Component Analysis (PCA). The highest number of individuals per day trap and of average richness were registered in the pasture, eucalyptus and forest areas in both periods, while soybean showed lower values with predominance of Coleoptera and Formicidae groups. The pasture and forest areas showed of higher Shannon index values in the two evaluated seasons, probably due to higher contributions organic residues in the soil that favors the shelter, feeding and reproduction conditions. Regarding the Pielou index, the soybean system showed higher values in this variable. The Aranae, Coleoptera, Formicidae and Diptera groups predominated in the humid period, while Coleoptera and Formicidae predominated in the dry period. Systems that generate greater accumulation of residues harbor a greater diversity of invertebrates of the edaphic fauna. Seasonality had an effect on all variables analyzed and the wet period showed more expressive values.

Resumo A cobertura vegetal pode mostrar padrões de diversidade e composição da comunidade de invertebrados do solo, em função da quantidade e qualidade da serapilheira em determinado habitat específico. O objetivo deste trabalho foi caracterizar a distribuição da fauna edáfica em diferentes monocultivos. O estudo foi realizado na fazenda Chapada Grande no município de Regeneração, PI. Foram escolhidas quatro áreas de monocultivos: soja em sistema de plantio direto, eucalipto, pastagem, além de uma mata nativa de cerrado preservada. Foram realizadas coletas da fauna do solo, em período seco e úmido, por meio de armadilhas do tipo pitfall contendo 4% de formol. A fauna edáfica foi avaliada pelo número de indivíduos por armadilha por dia, riqueza e riqueza média, índice de diversidade de Shannon e índice de uniformidade de Pielou. Os dados foram submetidos à análise de variância e à análise multivariada de Componentes Principais (ACP). O maior número de indivíduos por armadilha dia e de riqueza média foram registrados nas áreas pastagem, eucalipto e mata nos dois períodos, enquanto que a soja mostrou valores inferiores com predomínio dos grupos Coleoptera e Formicidae. As áreas de pastagem e mata mostraram maiores valores de índice de Shannon nas duas épocas avaliadas provavelmente em função de maiores aportes de resíduos orgânicos no solo que favorece as condições de abrigo, alimentação e reprodução. Em relação ao índice de Pielou o sistema com soja mostrou maiores valores nessa variável. Os grupos Araneae, Coleoptera, Formicidae e Diptera predominaram no período úmido, enquanto Coleoptera e Formicidae se destacaram no período seco. Sistemas que geram maior acúmulo de resíduos abrigam uma maior diversidade de invertebrados da fauna edáfica. A sazonalidade apresentou efeito sobre todas as variáveis analisadas sendo que o período úmido mostrou valores mais expressivos.

Proposal of an iELISA for Mycoplasma bovis diagnosis in dairy cattle and associated risk factors / [Proposta de um iELISA para diagnóstico de Mycoplasma bovis em bovinos leiteiros e fatores de risco associados]

Mycoplasma bovis is a highly contagious agent associated with several pathologies in cattle. The detection of reactive antibodies to M. bovis by Indirect Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (iELISA) identifies if there was an exposure to the microorganism. The current study aimed to optimize an iELISA from M. bovis total cell antigen, applying it to bovine serum samples, and to evaluate risk factors. Serum samples were obtained from 400 cows from 17 herds from Southeast Brazil. In the optimization of iELISA, the following was established: 2 µg/mL of antigen, sera dilution 1:300, and conjugate dilution 1:15000. The frequency was 62.3% (249/400) of reactive animals and 100% (17/17) of reactive herds. Risk factors were: herds with more than 100 animals (OR= 3.1; CI= 95%); Holstein breed (OR= 72.5; CI= 95%); cows (OR= 29.7; CI= 95%); intensive breeding system (OR= 3.3; CI= 95%); associated small ruminant production (OR= 4.4; CI= 95%); milk production above 500L (OR= 2.9; CI= 95%); no quarantine (OR= 1.5; CI= 95%); mechanical milking (OR= 5.5; CI= 95%) and cases of mastitis (OR= 5.5; CI= 95%). The proposed iELISA was able to detect antibodies reactive to M. bovis in bovine serum. Knowledge of these risk factors can assist in the implementation of prophylactic measures.(AU)

Mycoplasma bovis é um agente altamente contagioso relacionado a várias patologias em bovinos. A detecção de anticorpos reativos a M. bovis por Ensaio de Imunoadsorção Enzimática Indireto (iELISA) identifica se houve exposição ao microrganismo. O presente estudo teve como objetivo otimizar um iELISA de antígeno celular total de M. bovis, aplicando-o a amostras de soro bovino, bem como avaliar fatores de risco. Amostras de soro foram obtidas de 400 vacas de 17 rebanhos da Região Sudeste do Brasil. Na otimização do iELISA foram obtidos: 2µg/mL de antígeno, diluição dos soros 1:300 e do conjugado 1:15000. A frequência de animais reativos foi de 62,3% (249/400) e de 100% (17/17) para os rebanhos. Os fatores de risco foram: rebanhos com mais de 100 animais (OR= 3,1; IC= 95%); raça Holandesa (OR= 72,5;IC= 95%); vacas (OR= 29,7;IC= 95%); sistema intensivo (OR= 3,3; C= 95%); produção de pequenos ruminantes (OR= 4,4;IC=95%); produção de leite acima de 500L (OR= 2,9;IC= 95%); sem quarentena (OR= 1,5;IC= 95%); ordenha mecânica (OR= 5,5;IC= 95%) e casos de mastite (OR= 5,5;IC= 95%). O iELISA proposto foi capaz de detectar anticorpos reativos a M. bovis no soro bovino. O conhecimento desses fatores de risco pode auxiliar na implementação de medidas profiláticas.(AU)

Diagnosis and treatment of HEp-2 cells contaminated with mycoplasma / Diagnóstico e tratamento de células HEp-2 contaminadas por micoplasma

Abstract Contamination of primary and cell cultures by mycoplasmas is one of the main economic and biological pitfalls in basic research, diagnosis and manufacture of biotechnological products. It is a common issue which may be difficult to conduct surveillance on. Mycoplasma presence may affect several physiological parameters of the cell, besides being considered an important source of inaccurate and/or non-reproducible scientific results. Each cell type presents characteristical symptoms, mainly morphological, that indicate a contamination by mycoplasma. HEp-2 cells originate from carcinoma of the larynx and are, therefore, part of the respiratory tract, which is one of mycoplasma habitats. Despite the importance these cells in several biological research (evaluation of cell proliferation and migration, apoptosis, antiviral and antitumor compounds), the alterations induced by mycoplasma contamination in HEp-2 cells have not yet been described. Here, we describe the progressive morphological alterations in culture of HEp-2 cells infected with mycoplasma, as well as the-diagnosis of the infection and its treatment. Mycoplasma contamination described within this work led to cytoplasm elongation, cell-to-cell spacing, thin plasma membrane projections, cytoplasmic vacuoles, fusion with neighboring cells, and, finally, cell death. Contamination was detected by fluorescence imaging (DAPI) and PCR reactions. The cultures were treated with BM-Cyclin antibiotic to eliminate contamination. The data presented here will be of relevance to researchers whose investigations involve cell culture, especially respiratory and HEp-2 cells.

Resumo A contaminação de culturas primárias e celulares por micoplasmas é uma das principais armadilhas econômicas e biológicas da pesquisa básica, diagnóstico e fabricação de produtos biotecnológicos. Trata-se de uma contaminação rotineira, mas de difícil acompanhamento. A presença de micoplasma pode afetar vários parâmetros fisiológicos da célula, além de ser considerada uma importante fonte de resultados científicos imprecisos e/ou não reprodutíveis. Cada tipo de célula apresenta sintomas característicos, principalmente morfológicos, que indicam uma contaminação por micoplasma. As células HEp-2 são originárias do carcinoma da laringe e, portanto, fazem parte do trato respiratório, um dos habitats do micoplasma. Apesar da importância destas células em diversas pesquisas biológicas (avaliação da proliferação e migração celular, apoptose, compostos antivirais e antitumorais), as alterações decorrentes da contaminação por micoplasma nestas células ainda não foi descrita. Aqui, descrevemos as alterações morfológicas progressivas na cultura de células HEp-2 infectadas por micoplasma, bem como o diagnóstico da infecção e seu tratamento. A contaminação por micoplasma descrita neste trabalho resultou em alongamento citoplasmático, espaçamento entre células, projeções delgadas da membrana plasmática, vacúolos citoplasmáticos, fusão de células vizinhas e, finalmente, morte celular. A contaminação foi detectada por imagens de fluorescência (DAPI) e reações de PCR. As culturas foram tratadas com antibiótico BM-Cyclin para eliminar a contaminação. Os dados aqui apresentados serão de relevância para pesquisadores cujas investigações envolvem cultura celular, principalmente células respiratórias e HEp-2.

Effect of the subdose of human chorionic gonadotropin applied in the Hou Hai acupoint on ovulation induction in mares / [Efeito da subdose de gonadotrofina coriônica humana aplicada no acuponto Hou Hai sobre a indução da ovulação em éguas]

The objective of this study was to evaluate the effects of an hCG sub dose applied at the Hou Hai acupoint on corpus luteum (CL) quality and ovulation induction in mares. Fifteen crossbred mares were distributed in randomized blocks and used in three periods with each period employed as the blocking factor in three treatments: T1 = 1500 IU of hCG via intravenous (IV); T2 = 450 IU of hCG applied at the false acupoint (IV); and T3 = 450 IU of hCG applied at the Hou Hai acupoint. Mean diameter of the CL, serum concentration of progesterone (P4), vascularization of the pre-ovulatory follicle and CL were evaluated. Females administered 450 IU of hCG at the Hou Hai acupoint exhibited greater ovulation rates (33.33%) 48h after induction; The minimum number of colored pixel (NCP) of the pre-ovulatory follicle of control females was superior (40.33) to that of mares administered 450 IU of hCG IV at the false acupoint (36.84) and similar to that of those administered hCG at the Hou Hai acupoint (39.31). Further, moderately positive correlations were found between the CL diameter and the P4 concentration on D8 (P<0.05). IV administration of 450 IU of hCG or at the Hou Hai acupoint was efficient at inducing ovulation and ensuring the quality of CL in mares.(AU)

O objetivo foi avaliar os efeitos de uma subdose de hCG aplicada no acuponto Hou Hai na qualidade do corpo lúteo (CL) e na indução da ovulação em éguas. Quinze éguas mestiças foram distribuídas em blocos ao acaso, sendo o período utilizado como fator de blocagem, em: T1 = 1500 UI de hCG por via intravenosa (IV); T2 = 450 UI de hCG aplicado no falso acuponto (IV) e T3 = 450 UI de hCG aplicada no acuponto Hou Hai. Avaliou-se diâmetro médio do CL, concentração sérica de progesterona (P4), vascularização do folículo pré-ovulatório e do CL. As fêmeas que receberam 450 UI de hCG no acuponto Hou Hai apresentaram maiores taxas de ovulação (33,33%) 48h após a indução. O número de pixels coloridos (NPC) mínimo do folículo pré-ovulatório das fêmeas do grupo controle foi superior (40,33) ao das éguas que receberam 450 UI de hCG IV no falso acuponto (36,84) e semelhante ao das éguas que receberam hCG no acuponto Hou Hai (39,31); correlações moderadamente positivas foram encontradas entre o diâmetro do CL e a concentração de P4, ambos no D8 (P <0,05). A administração IV de 450 UI de hCG ou no acuponto Hou Hai foi eficiente na indução da ovulação e na garantia da qualidade do CL nas éguas.(AU)

Detection of the mecA gene in Staphylococcus spp. isolated from the nasal cavity of pigs - Preliminary data / [Detecção do gene mecA em Staphylococcus spp. isolados da cavidade nasal de suínos - dados preliminares]

O objetivo deste estudo foi realizar a caracterização genética de Staphylococcus spp. resistentes a meticilina isolados de suínos. Foram coletadas 30 amostras de swab nasal de suínos, abatidos em um frigorífico com Serviço de Inspeção Federal. Os isolados foram submetidos a análises macro e microscópicas que, em seguida, para detectar a resistência bacteriana, foram submetidos a ensaios fenotípicos da sensibilidade aos antimicrobianos. Posteriormente, as amostras resistentes a oxacilina, foram submetidas à reação em cadeia pela polimerase (PCR) para verificar a presença do gene mecA. Das 30 amostras analisadas, foram isolados 12 (40%) Staphylococcus spp. coagulase positiva, e 18 (60%) coagulase negativa, e, dentre os isolados, 26 (86,66%) foram resistentes a oxacilina sendo possível detectar o gene mecA em seis (23%) amostras. Este estudo evidencia a presença de genes de resistência em microrganismos comuns a microbiota de animais de produção que podem ser transmitidos ao homem. Além de chamar a atenção para a frequência e quantidade de antimicrobianos aos quais estes animais são expostos durante toda sua vida, podendo ser considerado um problema para a saúde única.(AU)

Efeito do ácido docosa-hexaenoico e do Trolox® no diluidor de refrigeração de sêmen de garanhões da raça Mangalarga Marchador / Effect of docosahexaenoic acid and Trolox® in extenders for cooling semen from Mangalarga Marchador stallion

Objetivou-se avaliar o efeito do ácido docosa-hexaenoico (DHA), associado ou não ao Trolox®, na refrigeração de sêmen de garanhões da raça Mangalarga Marchador. Foram refrigerados 10 ejaculados nos diluidores: D1) BotuSêmen® (BS; controle); D2) BS + 30ngmL-1 de DHA (BS30DHA); D3) BS30DHA + 40µM de Trolox® (BS30DHA40T); D4) BS + 50ngmL-1 de DHA (BS50DHA); D5) BS50DHA + 40µM de Trolox® (BS50DHA40T). Após 48 horas de refrigeração, foram avaliados os parâmetros de movimento espermático, a integridade estrutural e funcional da membrana plasmática e a longevidade espermática. Todos os diluidores testados preservaram, de forma semelhante, a motilidade, a linearidade, a retilinearidade, a amplitude do deslocamento lateral da cabeça, a frequência do batimento flagelar cruzado, o percentual de hiperativos e a integridade estrutural e funcional da membrana espermática (P>0,05). O diluidor BS50DHA foi superior ao BS30DHA40T em preservar a VCL e a VSL e foi superior ao BS30DHA40T e ao BS50DHA40T em preservar a VAP e o índice de oscilação (P<0,05). Conclui-se que o uso do Trolox® em diluidores utilizados para refrigeração de sêmen de garanhões contendo ácido docosa-hexaenoico, nas concentrações propostas, não é indicado por alterar parâmetros de movimento espermático considerados importantes para a fertilidade.(AU)

The objective of this study was to evaluate the effect of docosahexaenoic acid (DHA), associated or not with Trolox®, in extenders for cooling semen from Mangalarga Marchador stallions. Ten ejaculates were cooled in the following diluents: D1) BotuSemen® (BS; control); D2) BS + 30ngmL-1 DHA (BS30DHA); D3) BS30DHA + 40µM Trolox® (BS30DHA40T); D4) BS + 50ngmL-1 DHA (BS50DHA); D5) BS50DHA + 40µM Trolox® (BS50DHA40T). After 48 hours of refrigeration, the sperm movement, structural and functional integrity of the plasma membrane and sperm longevity were evaluated. All extenders tested similarly preserved motility, linearity, straightness of trajectory, amplitude of lateral head displacement, beat cross frequency, hyperactive, the structural and functional integrity of the sperm membrane (P> 0.05). The BS50DHA extender was superior to BS30DHA40T in preserving VCL and VSL and was superior to BS30DHA40T and BS50DHA40T in preserving VAP and oscillation index (P< 0.05). It is concluded that the use of Trolox® in extenders for cooling stallion sperm containing docosahexaenoic acid at the proposed concentrations is not indicated because it alters sperm movement parameters considered important for fertility.(AU)

Diferentes momentos de aplicação de gonadotrofina coriônica equina em protocolo de inseminação artificial em tempo fixo para vacas de leite / Different times of application of equine chorionic gonadotropin in fixed-time artificial insemination protocols for dairy cows

Avaliaram-se diferentes momentos de aplicação da gonadotrofina coriônica equina (eCG) em protocolos de inseminação artificial em tempo fixo (IATF) para vacas de leite. Foram utilizadas 76 fêmeas, as quais receberam, no dia zero (D0) do protocolo, dispositivos intravaginais de progesterona, sendo esses retirados no D9, e os animais foram, então, distribuídos aleatoriamente em três tratamentos: T1 - aplicação de eCG no momento da retirada dos dispositivos; T2 e T3 - aplicação de eCG 48h e 24h antes da retirada dos dispositivos, respectivamente. No D10 os animais receberam 1mg de GnRH, e a IATF foi realizada 52 horas após a retirada do implante. Não houve diferença (P>0,05) para intervalo entre a retirada do implante à ovulação (72,56±3,92h), o diâmetro do maior folículo no D9 (10,88±1,49mm), o diâmetro do folículo ovulatório (15,15±1,16mm) e do segundo maior folículo (7,49±0,52mm), a taxa de crescimento folicular (1,38±0,04mm/dia), a taxa de ovulação (96,67%), o intervalo entre diâmetro final e inicial do folículo dominante (73,49±3,84h), a área de corpo lúteo (2,27±0,43cm²), a porcentagem de CL no ovário direito (53,00%) e no esquerdo (26,33%) e a taxa de gestação (33,33%). O momento da aplicação da eCG não influenciou na eficiência do protocolo. Recomenda-se a utilização da eCG no momento da retirada do implante por otimização do manejo.(AU)

Different times of application of equine chorionic gonadotropin (eCG) in Fixed-Time Artificial Insemination (FTAI) protocols for dairy cows were evaluated. A total of 76 females were used, which received intravaginal progesterone devices on day zero (D0) of the protocol, which were withdrawn on D9, and the animals were then randomly distributed in three treatments: T1- application of eCG at the time of device withdrawal; T2 and T3 - application of eCG 48h and 24h before withdrawal of the devices, respectively. On D10 the animals received 1mg of GnRH and the FTAI was carried out 52 hours after the removal of the implant. There was no difference (P>0.05) for interval from implant removal to ovulation (72.56±3.92h), diameter of the largest follicle of D9 (10.88±1.49mm), diameters of ovulatory follicle (15.15±1.16mm) and of the second largest follicle (7.49±0.52mm), follicle growth rate (1.38±0.04mm/day), ovulation rate (96.67%), interval between final diameter and initial diameter of dominant follicle (73.49±3.84h), corpus luteum area (2.27±0.43cm²), percentage of CL in right ovary (53.00%) and in left ovary (26.33%) and pregnancy rate (33.33%). The time of the application of eCG did not influence the efficiency of the protocol. We recommend the use of eCG at the time of the removal of the implant for management optimization.(AU)

Effects of tenectomy of the medial head of the deep digital flexor on the hindlimbs of healthy horses / Efeitos da tenectomia da cabeça medial do tendão flexor digital profundo nos membros posterior de cavalos saudáveis

The tenectomy of the medial head of the deep digital flexor (TMHDDF) is a minimally studied surgery used in cases of dorsal subluxation of the proximal interphalangeal joint of the hindlimb in horses. The TMHDDF was evaluated in six healthy horses by the degree of lameness, perimeter of the surgical site, the angle of the distal articular joints, and the linear and angular measures of the hoof. Thus, TMHDDF of the right hindlimb was performed and the contralateral limb was used as a control. Both, right and left limbs were evaluated before surgery, as well as at 15, 30, and 60 days after surgery aiming to evaluate the effects of the surgical procedure in healthy limbs. Data were compared by analysis of variance regarding days and limbs. Values below the significant level (P< 0.05) were analyzed using the Tukey's test. TMHDDF caused a mild increase of the toe length and the height of lateral heel (0.2cm in both), as well as a decrease of the angle of the proximal interphalangeal joint (2°) when comparing the left hindlimb to the right hindlimb, 30 and 60 days after surgery. Overall, TMHDDF did not cause significant changes in the evaluated variables up to the 60 days of surgery.(AU)

A tenectomia da cabeça medial do flexor digital profundo (TCMFDP) é uma técnica cirúrgica pouco estudada, indicada para equinos com subluxação dorsal da articulação interfalângica proximal do membro pélvico. A TCMFDP foi avaliada em seis equinos hígidos no grau de claudicação; na perimetria da área operada; nos ângulos articulares distais; e nas medidas lineares e angulares de parâmetros dos cascos. Nesse sentido, foi realizada a TCMFDP do membro pélvico direito, permanecendo o esquerdo como controle. Ambos os membros foram avaliados nos momentos pré-operatório (0) e 15, 30 e 60 dias após a cirurgia, sendo objetivo avaliar os efeitos do procedimento cirúrgico em membros hígidos. Para comparação dos dados entre momentos e membros, foi realizada análise de variância. Os valores inferiores ao de significância (P<0,050) foram submetidos ao teste de Tukey. A TCMFDP provocou discreto aumento (0,2cm, em ambos) do comprimento de pinça e da altura do talão lateral e redução no ângulo da articulação interfalângica proximal (2°) na comparação com o membro pélvico esquerdo aos 30 e 60 dias após a cirurgia no contralateral. Em geral, a TCMFDP não causou alterações influentes nos aspectos avaliados até 60 dias do experimento.(AU)

Antibacterial and antiproliferative activities of the fresh leaf essential oil of Psidium guajava L. (Myrtaceae) / Atividades antibacteriana e antiproliferativa do óleo essencial das folhas frescas de Psidium guajava L. (Myrtaceae)

Abstract This study evaluated the antibacterial and antiproliferative activities of the essential oil of Psidium guajava leaves (PG-EO), traditionally used in folk medicine. The essential oil was obtained from fresh leaves by hydrodistillation, using a modified Clevenger apparatus. The major PG-EO chemical constituents were identified by GC-MS and GC-FID as being β-caryophyllene (16.1%), α-humulene (11.9%), aromadendrene oxide (14.7%), δ-selinene (13.6%), and selin-11-en-4α-ol (12.5%). The antibacterial activity of the essential oil of P. guajava leaves was determined in terms of its minimum inhibitory concentrations (MIC) using the broth microdilution method in 96-well microplates. PG-EO had moderate activity against Streptococcus mutans (MIC = 200 µg/mL), S. mitis (MIC = 200 µg/mL), S. sanguinis (MIC = 400 µg/mL), S. sobrinus (MIC = 100 µg/mL), and S. salivarius (MIC = 200 µg/mL). The antiproliferative activity was evaluated against different tumor cell lines: breast adenocarcinoma (MCF-7), human cervical adenocarcinoma (HeLa), and human gliobastoma (M059J). A normal human cell line (GM07492A, lung fibroblasts) was included. The antiproliferative activity was evaluated using the XTT assay and the results were expressed as IC50. The essential oil showed significantly lower IC50 values against MCF-7 and M059J lines than that obtained for the normal line, showing selectivity. Our results suggest that the essential oil of Psidium guajava L. has promising biological activities and can be considered a new source of bioactive compounds.

Resumo Este estudo avaliou as atividades antibacteriana e antiproliferativa do óleo essencial das folhas frescas de Psidium guajava (PG-OE), tradicionalmente utilizadas na medicina popular. O óleo essencial foi obtido por hidrodestilação das folhas frescas, utilizando aparelho do tipo Clevenger. Os principais constituintes químicos de PG-OE identificados por CG-EM e CG-DIC foram: β-cariofileno (16,1%), α-humuleno (11,9%), óxido de aromadendreno (14,7%), δ-selineno (13,6%) e selin-11-en-4α-ol (12,5%). A atividade antibacteriana do óleo essencial das folhas de P. guajava foi determinada em termo de sua concentração inibitória mínima (CIM) utilizando o método de microdiluição de caldo em microplacas de 96 poços. PG-OE apresentou moderada atividade contra Streptococcus mutans (CIM = 200 μg/mL), S. mitis (CIM = 200 μg/mL), S. sanguinis (CIM = 400 μg/mL), S. sobrinus (CIM = 100 μg/mL) e S. salivarius (CIM = 200 μg/mL). A atividade antiproliferativa foi avaliada frente a diferentes linhagens de células tumorais como: adenocarcinoma de mama (MCF-7), adenocarcinoma cervical humano (HeLa) e gliobastoma humano (M059J). Foi incluída uma linhagem celular humana normal (GM07492A, fibroblastos pulmonares). A atividade antiproliferativa foi avaliada utilizando o ensaio XTT e os resultados foram expressos como CI50. As linhagens MCF-7 e M059J mostraram valores significativamente mais baixos de CI50 do que os obtidos para a linhagem normal, mostrando seletividade. Nossos resultados sugerem que o óleo essencial das folhas frescas de Psidium guajava L. possui atividades biológicas promissoras e pode ser considerado como uma nova fonte de compostos bioativos.

Qualidade seminal e perfil metabólico de caprinos alimentados com semente de linhaça na dieta / Semen quality and metabolic profile of goats fed flaxseed in the diet

O objetivo da presente pesquisa foi avaliar o efeito da inclusão de semente de linhaça na dieta sobre a qualidade seminal e o perfil metabólico de machos caprinos. Foram utilizados 16 machos da raça Saanen, distribuídos aleatoriamente em quatro grupos, recebendo níveis de inclusão de semente de linhaça (0, 4, 8 e 12%) na dieta, durante um período de 60 dias. As coletas e as avaliações seminais foram realizadas duas vezes por semana. Os animais foram submetidos a coletas quinzenais de sangue, durante todo o período experimental. Os dados foram avaliados por ANOVA e pela análise de regressão a 5% de significância. Houve comportamento cúbico para motilidade espermática progressiva, que apresentou o maior valor (82,30%) com a adição de 9,92% de semente de linhaça na dieta (P<0,05). Houve comportamento cúbico para concentração plasmática de triglicerídeos, e o nível de 8% de semente de linhaça na dieta apresentou média de 43,32mg dL-1, acima dos valores normais para a espécie caprina (P<0,05). A inclusão de semente de linhaça na dieta de machos caprinos proporcionou melhora na produção espermática e na qualidade seminal. No entanto, devem-se considerar os possíveis efeitos dos níveis superiores a 4% de semente de linhaça sobre o perfil metabólico dos animais.(AU)

This study aimed to evaluate the effect of flaxseed inclusion in the diet of male goats through the semen quality and metabolic profile. Randomly allocated 16 Saanen males were placed into four groups receiving flaxseed inclusion levels (0, 4, 8 and 12%) in the diet over a period of 60 days. The collections and seminal evaluations were performed twice a week. The animals were subjected to biweekly blood collections from the beginning to the end of the trial period. The data were evaluated by ANOVA and regression analysis at 5% significance. A cubic behavior for motility, with the highest value (82.30%) with the addition of 9.92% of flaxseed in the diet (P< 0.05) was detected. A cubic behavior for plasma triglyceride concentration and the level of 8% of flaxseed in the diet averaged 43.32mg dL -1 above normal values for goats (P< 0.05) was detected. The inclusion of flaxseed in the diet of male goats improved sperm production and quality. However, one should consider the possible effects of the levels above 4% of flaxseed on the metabolic profile of the animals.(AU)

Farmacopuntura utilizando os acupontos Hou Hai e Bai Hui em protocolos de sincronização de estro em cabras / Pharmacopuncture using acupoints Hou Hai and Bai Hui in estrous synchronization protocols in goats

Avaliou-se a eficiência da administração de subdoses de eCG nos acupontos Bai Hui e Hou Hai em protocolos de sincronização de estro em cabras. Na primeira etapa, 57 cabras foram distribuídas aleatoriamente em quatro tratamentos: T1- 300UI de eCG intramuscular (IM); T2- 60UI de eCG no acuponto Hou Hai; T3- 60UI de eCG no acuponto Bai Hui e T4- 60UI de eCG IM; e na segunda etapa, 28 cabras foram distribuídas aleatoriamente em três tratamentos: T1- 300UI de eCG IM; T2- 30UI de eCG no acuponto Bai Hui e T3- 30UI de eCG IM. Ao final do tratamento hormonal, as cabras foram monitoradas para detecção do estro, realização das coberturas e avaliação do comportamento reprodutivo. Os dados foram submetidos à análise de normalidade, seguida dos testes estatísticos adequados para cada variável. Na primeira etapa experimental, obteve-se maior duração de estro nas cabras do T1 (P=0,009). Na segunda etapa experimental, obteve-se maior número de animais em estros no T1 (P=0,03). As demais variáveis para ambas as etapas não sofreram influência dos tratamentos (P>0,05), demonstrando que a administração de subdoses de eCG nos acupontos Bai Hui e Hou Hai foi eficiente para sincronizar o estro.(AU)

The efficiency of administration of subdoses of eCG in the Bai Hui and Hou Hai acupoints in oestrus synchronization protocols in goats was evaluated. In the first stage, 57 goats were randomly assigned to four treatments: T1- 300UI of intramuscular eCG (IM); T2- 60UI of eCG in acupoint Hou Hai; T3- 60UI of eCG in the Bai Hui acupoint and T4- 60UI of eCG IM; and in the second stage, 28 goats were randomly assigned to three treatments: T1-300UI of eCG IM; T2-30UI of eCG in the Bai Hui acupoint and T3- 30UI of eCG IM. At the end of the hormonal treatment the goats were monitored for estrus detection, and evaluation of reproductive behavior. The data were submitted to normality analysis, followed by appropriate statistical tests for each variable. In the first experimental stage, a longer duration of estrus in the T1 goats (P= 0.009) was obtained. In the second experimental stage, a greater number of animals were obtained in estrus at T1 (P= 0.03). The other variables for both experiments were not influenced by the treatments (P> 0.05), demonstrating that administration of eCG subdoses in the Bai Hui and Hou Hai acupoints was efficient to synchronize the estrus.(AU)

Phylogeny of the genus Stephomyia Tavares, 1916 (Diptera: Cecidomyiidae) / Filogenia do gênero Stephomyia Tavares, 1916 (Diptera: Cecidomyiidae)

Abstract Stephomyia Tavares, 1916 comprises seven species, all Neotropical: S. clavata (Tavares, 1920); S. epeugeniae Gagné, 1994; S. espiralis Maia, 1993; S. mina Maia, 1993; S. rotundifoliorum Maia, 1993; S. tetralobae Maia, 1993; and S. eugeniae (Felt, 1913). In the present study, a cladistic analysis based upon adult, pupa, larva and gall morphological characters as well as host plant data is carried out in order to discuss the monophyly of the genus and the relationships among the known species. The Stephomyia monophyly was supported by eight synapomorphies: five homoplastic characters and three non-homoplastic characters. Analyzes showed S. clavata with great instability within the genus, probably due to lack of larva, pupa and female data, so S. clavata was deactivated in analyze. The topology found was (S. mina ((S. eugeniae + S. epeugeniae) (S. tetralobae (S. rotundifoliorum + S. espiralis)))).

Resumo Stephomyia Tavares, 1916 compreende sete espécies, todas neotropicais: S. clavata (Tavares, 1920); S. epeugeniae Gagné, 1994; S. espiralis Maia, 1993; S. mina Maia, 1993; S. rotundifoliorum Maia, 1993; S. tetralobae Maia, 1993 e S. eugeniae (Felt, 1913). Neste estudo, uma análise cladística baseada em caracteres morfológicos dos adultos, pupa, larva e galha, bem como na informação das plantas hospedeiras é realizada e a monofilia do gênero e as relações entre as espécies conhecidas são discutidas. A monofilia de Stephomyia foi suportada por oito sinapomorfias: cinco caracteres homoplásticos e três não homoplásticos. Análises mostraram uma grande instabilidade de S. clavata dentro do gênero, provavelmente devido à falta de informações sobre a larva, a pupa e a fêmea, o que resultou em desativação na análise. A topologia encontrada foi (S. mina ((S. eugeniae + S. epeugeniae) (S. tetralobae (S. rotundifoliorum + S. espiralis)))).